小鼠單核巨噬細胞；J774A.品牌

操作流程：
. 小鼠單核巨噬細胞；J774A.品牌主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-43），co2孵箱（日本yamato it-6）。
.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
.2. 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～0倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以×05/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用0×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×04。
.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞，以0.25％消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于2個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×00％，計算貼壁率。 
.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液，以×04/孔接種于24孔板，每孔加入ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)0d，繪制細胞生長曲線

本公司提供的細胞都是現(xiàn)貨供應，詳細小鼠單核巨噬細胞；J774A.品牌說明書！

細胞名稱 小鼠單核巨噬細胞；J774A.品牌
形態(tài)特性 單核細胞/巨噬細胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細胞來源于BABL/cN小鼠，有抗體依賴的吞噬作用，生長受硫酸葡聚糖、PPD和LPS的抑制；可產生IL-β和大量的。

培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-2 4.5g/Liter Glucose) 新生牛血清，0%

傳代方法 ：3~：6

傳代情況

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）

STR

同工酶

染色體

主要功能：
（）小鼠單核巨噬細胞；J774A.品牌血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達鈣通道及ICAM-和VCAM-，參與血管壁的炎癥反應。
（3）與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關。
 生理變化：
（）主動脈硬化。
（2）主動脈瘤
（3）主動脈鈣化。
基本特性：
（）小鼠單核巨噬細胞；J774A.品牌組織來源于正常大鼠大動脈組織。
（2）鑒定：肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每凍存管細胞數(shù)：>5×05 cells/ml。
（5）肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
（6）不含有HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

運輸和保存：
小鼠單核巨噬細胞；J774A.品牌視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
)mL凍存細胞懸液裝于.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存?zhèn)€月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
具體操作：
.預熱培養(yǎng)用液：把已經配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。
2.用75％酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械：保證足夠的*作空間，不僅便于*作而且可減少污染。
4.點燃酒精燈：注意火焰不能太小。
5.準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶，放入微波爐內高火，8分鐘再次消毒。
6.取出預熱好的培養(yǎng)用液：大鼠主動脈平滑肌細胞取出已經預熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。
7.從培養(yǎng)箱內取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞。
8.打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。?

CAS 23239-88-5 訂購|咨詢  規(guī)格： 00mg

二羥丙E CAS 759-8-8 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

3-異倒捻子素 CAS 5549 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支

白藜蘆醇 CAS 50-36-0 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支

3;Menadione CAS 58-27-5 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

萊苞迪甙A;Rebaudioside A CAS 58543-6- 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

刺五加苷B;Eleutheroside CAS 8-34-3 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

撲磷（甲噻磷）;純品型;標準品;有證 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 0.g

原百部堿 CAS 27495-40-5 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

積雪草酸 CAS 464-92-6 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial

山梔苷甲酯 CAS 6442-28-9 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

迷迭香酸 CAS 20283-92-5 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

小鼠單核巨噬細胞；J774A.品牌Phospho-NFKB(Ser907)  磷酸化細胞核因子p50/k基因結合核因子抗體 規(guī)格: 0.ml

PBEF(CT)  內脂素/內臟脂肪素(C端抗體) 規(guī)格: 0.ml

pan 4-3-3  4-3-3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

PMA/Prostate Mucin Antigen  前列粘蛋白抗原抗體 規(guī)格: 0.2mlIroquois homeobox protein 3  Irx3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Tubb3/Tubulin beta 3  微管蛋白β3抗體 規(guī)格: 0.ml

Rabbit Anti-rat IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.ml

IGFBP5/IBP5  胰島素樣生因子結合蛋白5抗體 規(guī)格: 0.ml

CCR7/CD97  細胞表面趨化因子受體7抗體 規(guī)格: 0.ml

GTPBP9  核苷酸結合蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-ICAM(Tyr52)  磷酸化細胞間粘附分子抗體 規(guī)格: 0.ml

Caspase 2  半胱胺酸蛋白酶-2抗體 規(guī)格: 0.ml